Přibližně 15 procent  párů touží po vlastním dítěti, ale tato touha je často díky různým příčinám nenaplněna. Často těmto párům pomůže jen umělé oplodnění vajíčka spermií partnera po předchozí hormonální folikulární stimulaci.
K dosažení co nejlepších výsledků, se zavádí embryo ve fázi blastocysty, což je embryo
5. den po oplodnění.
Doposud se předpokládalo, že vývoj embryí závisí především na kvalitě vajíček souvisejících s věkem ženy, které jsou ženě odebírány. U spermií se člověk domníval, že přispívá jen jeho genotypem. Ale tak tomu není. Náš tým (první autor Dr. Pierre Vanderzwalmen), mohl poprvé ukázat krátce ve svém díle, které bylo publikováno v jednom renomovaném zahraničním hospodářském deníku (RBM online), že stav semene daleko více ovlivňuje další vývoj embryí, než že by jen předával dědičnou informaci.
Podstatné je zdůraznit, že všechny naše pozorování byly možné právě proto, že je u nás vývoj všech embryí prováděn vždy až do fáze blastocysty (embryo 5. den po oplodnění). Běžně se u nás používá k oplodnění tzv. intracytoplasmatická injekce spermie, zkráceně také nazývána ICSI, což je mikromanipulační technika, při které embryolog pomocí mikropipety vpraví spermii přímo do vajíčka a tímto dojde k oplodnění. Tato metoda se využívá především tehdy, když není nález v semeni optimální (mužská neplodnost)a semeno samo od sebe nezvládne vajíčko oplodnit (oplodnění ve zkumavce nebo-li IVF) U mnoha párů, kteří si přejí mít vlastní dítě má semeno partnera zhoršenou kvalitu.
K čemu jsme se dopátrali?
Pomoci metody ICSI může být kvalita spermií pozorována až s 400násobným zvětšením, tím je zabezpečeno, že jsou k oplodnění použity jen ty nejlepší spermie (přesněji řečeno provádí se „výběr nejlepší spermie“).

S novou metodou nazývanou intracytoplasmatická injekce morfologicky selektovaných spermií, také označována jako IMSI, mohou být spermie ještě lépe posouzeny,  protože se prohlíží v rozlišení 6600-12.500 (Pokud si představíte dalekohled, se kterým pozorujete plochu měsíce:je to přirozeně něco jiného s Hubblovo kosmickým teleskopem než, když byste ho pozorovali operním kukátkem). Nyní můžeme s touto novou IMSI metodou ukázat, že i při výskytu normálního nálezu semene, existují rozdíly
v jeho kvalitě, které nemohou být rozlišeny ICSI metodou.
V průměru má 50 % všech spermií špatnou kvalitu. Čím horší je nález v semenu, tím je k dispozici méně dobrých spermií. S pomocí technologie IMSI  jsme mohli vytvořit novou klasifikaci třídění podle kvality semene (kvalita semene 1-4). Pokud se k oplodnění použije semeno s kvalitou 1 až 2, rozvíjí se významně více embryí až do stádia blastocyt, než když se použije semeno s kvalitou 3-4.
Zajímavějším způsobem nebyla tato signifikace 3. den vyvíjejících se embryí jasně patrná. Z naší práce usuzujeme, že vedle výběru blastocysty by se měl provádět v každém případě také výběr spermií. Ve většině případů je možné najít také spermie kvality 1-2. To je však možné jen s výběrem spermií pomocí IMSI.

Celkové shrnutí publikované práce:
Vanderzwalmen P, Hiemer A, Rubner P, Bach M, Neyer A, Stecher A, Uher P, Zintz M, Lejeune B, Vanderzwalmen S, Cassuto G, Zech NH. Vývoj blastocyst po uskutečnění selekce spermií za použítí velkého rozlišení a počtu nukleárních vakuol. Reprod Biomed Online. 2008; 17(5): 617-27.

Institut reprodukční medicíny a endokrinologie, Bregenz, Rakousko.
pierrevdz@hotmail.com

Výběr spermií za použítí velkého zvětšení pod mikroskopem a embryontransfer provedený nejdříve v den 3 po oplodnění vajíčka partnerouvou spermií mnohokrát zvyšují šanci na otěhotnění.
Cílem studie bylo demonstrovat schopnost kvalitního vývoje embrya až do dne 5 (fáze blastocysty) na základě výběru spermií bez přítomnosti vakuol v jádru spermie.

Výběr spermií v rozlišení 6000 x 12,500: I. stupeň – žádné vakuoly, II. stupeň - < nebo = malé vakuoly, III. stupeň > nebo =1 velké vakuoly, IV. stupeň - velké vakuoly s ostatními abnormalitami.

Výsledek vývoje embryí ve vzorku 25-ti pacientů, u kterých byla vajíčka injekována spermiemi, které měly různý stupeň kvality spermií (viz. třídění výše), nebyl do 3. dne po oplodnění pozorován v kvalitě embrya žádný větší rozdíl. Vývoj embrya do fáze blastocysty byl prokázán
u 56,3 % a 61,4 % vybraných spermií I. a II. stupně, ve srovnání
se spermiemi III. stupně, kde se do fáze blastocysty dostalo
pouze 5,1 % a u stupně IV. vůbec žádné procento respektive (hodnota byla < 0.001).  

Výběr spermií za pomoci velkého rozlišení použitím kontrastu Normarského, který je vhodný pro precizní stanovení velikosti a počtu nukleárních vakuol, které velmi negativně ovlivňují vývoj embrya
do stadia blastocysty. Toto pozorování potvrzuje předchozí studii ukazující možnost “časných a pozdních paternálních efektů”, které mohou mít dopad na vývoj embrya v jeho časném stádiu rozvoje.
 
Obrázek 1:  Spermie pozorované pomocí  Nomarského a Hoffmanovo  optického systému v různých rozlišeních. (A) Nomarski differential interference contrast at ×1000 x zvětšení (×100 DIC objective). (B) Nomarski differential interference contrast at ×12,000 zvětšení (×100 DIC objektiv plus VarioC-mount Zoom). (C) Hoffman modulation contrast at ×400 zvětšení (×40 HMC objective). (D) Hoffman modulation contrast at ×1000 zvětšení (×40 HMC objektiv  plus VarioC-mount Zoom). Krátké šipky: malé vakuoly;  dlouhá šipka: rozsáhlé vakuoly.

zpět